Объемный метод определения сырой клетчатки
Приборы и материалы
- проба массой 10 г;
- 2%-ный раствор НCl;
- 80 %- раствор Н2SO4;
- стеклянный фильтр;
- набор реактивов для определения сахаров методом Бертрана
Техника проведения анализа
Клетчатку определяют в остатке материала после извлечения гемицеллюлоз. Этот остаток промывают водой и осторожно высушивают до воздушно-сухого состояния при температуре не выше 50° С. Высушенный материал переносят в колбу, где проводили гидролиз гемицеллюлоз, заливают 10 объемами 80%-ной серной кислоты (относительной плотностью 1,74), и оставляют на 2,5 ч при комнатной температуре, периодически размешивая осадок стеклянной палочкой для лучшего смачивания его кислотой. Стеклянный фильтр, через который отфильтровывали гидролизат гемицеллюлоз промывают той же кислотой для полного извлечения частичек клетчатки и присоединяют ее к кислоте, находящейся в колбе.
По истечении 2,5 ч прибавляют 15 объемов воды на 1 объем кислоты, вводя некоторую часть воды через фильтр, затем проводят гидролиз клетчатки в течение 5 ч в кипящей водяной бане. Гидролизат фильтруют через тот же стеклянный фильтр, промывают 3—4 раза водой, объем раствора доводят до 200 см3 и определяют в нем глюкозу по Бертрану.
Обработка результатов
Содержание клетчатки Ск в % в твердом материале или г/100 см3 жидкости определяют по уравнению (1.5).
Ск=
, (1.5)
Где: а - количество исследуемого твердого материала (в г) или жидкости (в см3);
b — количество сахара, определенного при реакции, с растворами Фелинга, мг;
V1—объем гидролизата, см3;
V2 — объем гидролизата, взятого на определение cахаров, см3
0,9 — коэффициент для пересчета сахаров в клетчатку;
100—пересчет в проценты;
1000 — перевод мг в г.
При анализе, всегда получают один и тот же объем гидролизата (V1= 200) и на определение сахаров берут всегда 20 см3 (V2). Поэтому можно упростить уравнение, (1.5), подставив в него, эти постоянные величины и выполнив сокращения. Тогда уравнение примет вид:
Ск=
Пример. На анализ взято 50 см3 (а) барды. При определении в гидролизате глюкозы по Бертрану на титрование пошло 10,3 см3 перманганата с поправочным коэффициентом 0,525. Поправка на реактивы 0,1. Расход стандартного раствора реактива составит (10,3—0,1)х0,525=5,36 см3.
Количество восстановленной меди 53,6 мг. Этому количеству меди эквивалентно 27,38 мг глюкозы. Содержание клетчатки в барде составит по формуле (1.5):
Ск=
= 0,493 г/100 см3.