Биологическая химия
  • Регистрация
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Рейтинг 0.00 (0 Голоса)

Опыт 2. Разделение модельной смеси водорастворимых витаминов методом тонкослойной хроматографии.

Метод основан на способности жидкой фазы, продвигающейся по слою сорбента (силикагель), перемещать компоненты разделяемой смеси с разными скоростями. Положение пятен разделяемых витаминов на хроматограмме характеризуют значением Rf.

Ход опыта. В угол силуфоловой пластинки на расстоянии 2 см от каждой стороны наносят раствор смеси витаминов по 5 мкл (3 мкг/мкл) растворов тиамина, аскорбиновой кислоты, никотиновой кислоты, 10 мкл (3 мкг/мкл) пиридоксина. Проводят двухмерную хроматографию. Для первого направления используют подвижную фазу 1 (бензол – этанол – уксусная кислота – ацетон; 70:20:5:5), затем подсушивают и проводят разделение в перпендикулярном направлении подвижной фазой 2 (бензол – этанол – уксусная кислота – ацетон; 55:35:5:5). Замена этанола метанолом существенно повышает эффективность разделения. Затем пластинки сушат и выявляют пятна отдельных витаминов в ультрафиолетовом свете, используя следующие значения Rf для тиамина, пиридоксина, аскорбиновой кислоты, рибофлавина, никотиновой кислоты: с подвижной фазой 1 – 0,00; 0,17; 0,48; 0,53; 0,68; с подвижной фазой 2 – 0,00; 0,60; 0,16; 0,22; 0,44.

 

Добавить комментарий


Защитный код
Обновить

По темам:

История Украины

Культурология

Высшая математика

Информатика

Охотоведение

Статистика

География

Военная наука

Английский язык

Генетика

Разное

Технологиеские темы

Украинский язык

Филология

Философия

Химия

Экология

Социология

Физическое воспитание

Растениевосдство

Педагогика

История

Психология

Религиоведение

Плодоводство

Экономические темы

Бухгалтерские темы

Маркетинг

Иностранные языки

Ветеринарная медицина

Технические темы

Землеустройство

Медицинские темы

Творчество

Лесное и парковое хозяйство